FLAG標簽(qian)蛋(dan)白(bai)產(chan)品為重組表達(da)的(de)人源(yuan)SLC7A11-SLC3A2異(yi)源(yuan)二(er)聚(ju)體跨膜(mo)蛋(dan)白(bai)復合(he)物(wu)，帶(dai)有(you)C端FLAG標簽(qian)和(he)His標簽(qian)，采(cai)用(yong)特(te)殊(shu)去垢劑(ji)配方維(wei)持(chi)其(qi)天然構象和(he)功能(neng)活(huo)性(xing)。該復合(he)物(wu)在(zai)細(xi)胞氧(yang)化(hua)還原(yuan)平(ping)衡和(he)鐵死(si)亡調控(kong)中(zhong)起(qi)關(guan)鍵作用(yong)。

FLAG標簽(qian)蛋(dan)白(bai)，重組人SLC7A11-SLC3A2異(yi)源(yuan)二(er)聚(ju)體蛋(dan)白(bai)（FLAG & His標簽(qian)，去(qu)垢劑型(xing)）
UA060015

產(chan)品描述(shu)

本產(chan)品為重組表達(da)的(de)人源(yuan)SLC7A11-SLC3A2異(yi)源(yuan)二(er)聚(ju)體跨膜(mo)蛋(dan)白(bai)復合(he)物(wu)，帶(dai)有(you)C端FLAG標簽(qian)和(he)His標簽(qian)，采(cai)用(yong)特(te)殊(shu)去垢劑(ji)配方維(wei)持(chi)其(qi)天然構象和(he)功能(neng)活(huo)性(xing)。該復合(he)物(wu)在(zai)細(xi)胞氧(yang)化(hua)還原(yuan)平(ping)衡和(he)鐵死(si)亡調控(kong)中(zhong)起(qi)關(guan)鍵作用(yong)。

產(chan)品特(te)性(xing)

• 完(wan)整復合(he)物(wu)：包含SLC7A11（xCT）和(he)SLC3A2（4F2hc）完(wan)整跨膜(mo)結(jie)構(gou)域

• 雙重標簽(qian)：C端FLAG標簽(qian)（SLC7A11）和(he)His標簽(qian)（SLC3A2）

• 活(huo)性(xing)維(wei)持(chi)：含0.03% DDM去垢(gou)劑的(de)緩沖(chong)體(ti)系(xi)保(bao)持(chi)蛋白(bai)溶解(jie)狀(zhuang)態(tai)

• 高純(chun)度(du)：>90%（SDS-PAGE與SEC-MALS聯(lian)用(yong)檢(jian)測(ce)）

• 嚴格(ge)質(zhi)控(kong)：每批(pi)次提供Western blot驗(yan)證報(bao)告

• 保存(cun)條件(jian)：-80℃（50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 0.03% DDM, 10%甘(gan)油，pH 7.5）

•  

應用(yong)方向(xiang)

• 功能(neng)研究(jiu)：轉運(yun)活(huo)性(xing)測定（需配合(he)放(fang)射性(xing)/熒光標記底(di)物(wu)）

• 抗(kang)體(ti)開(kai)發(fa)：構(gou)象(xiang)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)篩(shai)選(xuan)

• 互(hu)作分析：通過FLAG/His標簽(qian)進行pull-down實驗(yan)

• 藥物(wu)篩選(xuan)：鐵死(si)亡調節劑(ji)高通(tong)量(liang)篩選(xuan)平(ping)臺(tai)構建

•  

註意(yi)事(shi)項(xiang)

1. 解(jie)凍(dong)後需輕柔混勻(yun)，避免(mian)劇(ju)烈震蕩

2. 建議工(gong)作濃度(du)：0.1-1 μg/mL（功能(neng)實驗需優化(hua)）

3. 不可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)SDS-PAGE（需先用(yong)丙酮(tong)沈澱(dian)去(qu)除去(qu)垢劑）

4. 配套(tao)對照蛋(dan)白(bai)（貨號(hao)UA060016）可單(dan)獨訂購

關(guan)於斯(si)達(da)特(te)(Starter)，國產(chan)抗(kang)體(ti)專家(jia)：
杭州(zhou)斯(si)達(da)特(te)在(zai)為全球(qiu)生(sheng)命科(ke)學(xue)行業(ye)提供優(you)質(zhi)的(de)抗(kang)體(ti)、蛋(dan)白(bai)、試劑(ji)盒等(deng)產(chan)品及(ji)研(yan)發(fa)服(fu)務(wu)。依(yi)托多個開(kai)發(fa)平(ping)臺(tai)：重組免(mian)單抗(kang)、重組鼠(shu)單抗(kang)、快(kuai)速(su)鼠(shu)單抗(kang)，重組蛋(dan)白(bai)開(kai)發(fa)平(ping)臺(tai) (E.coli,CHO,HEK293,InsectCells)，已正(zheng)式通(tong)過歐盟98/79/EC認證ISO9001認證ISO13485.

FLAG標簽(qian)蛋(dan)白(bai)的(de)作用(yong)：  

1.蛋白(bai)檢測(ce)與鑒(jian)定  

Westernblot驗證(zheng)：FLAG標簽(qian)可(ke)與商(shang)業(ye)化(hua)的(de)抗(kang)FLAG單(dan)克隆抗(kang)體(ti)（如(ru)M2抗(kang)體(ti)）特(te)異(yi)性(xing)結合(he)，即使(shi)目(mu)的(de)蛋白(bai)本身缺(que)乏(fa)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)，也能通(tong)過檢(jian)測(ce)FLAG標簽(qian)來(lai)驗證蛋(dan)白(bai)的(de)表達(da)情(qing)況(kuang)（如(ru)表達(da)與否(fou)、分(fen)子量(liang)大(da)小(xiao)、表達(da)量變(bian)化(hua)）。  

例如：在(zai)基(ji)因(yin)工(gong)程中，將FLAG標簽(qian)與目(mu)的(de)基(ji)因(yin)融合(he)表達(da)後，通過抗(kang)FLAG抗(kang)體(ti)的(de)Westernblot可快(kuai)速確(que)認目(mu)的(de)蛋白(bai)是否(fou)成功表達(da)。  

免疫(yi)熒光定(ding)位：利用(yong)抗(kang)FLAG抗(kang)體(ti)進行細胞(bao)免(mian)疫熒光染色(se)，可定(ding)位融合(he)蛋白(bai)在(zai)細(xi)胞內的(de)分布(bu)（如細(xi)胞(bao)質(zhi)、細(xi)胞(bao)核、細(xi)胞膜(mo)等(deng)），研(yan)究(jiu)蛋白(bai)的(de)亞細(xi)胞定(ding)位與功(gong)能(neng)關(guan)聯(lian)。  

ELISA定量(liang)：通過抗(kang)FLAG抗(kang)體(ti)建(jian)立(li)ELISA體系，可對重組蛋(dan)白(bai)進行定量(liang)分(fen)析，評估不同(tong)實(shi)驗(yan)條件(jian)下的(de)蛋白(bai)表達(da)水平(ping)。  

2.蛋白(bai)純(chun)化(hua)與分(fen)離(li)  

親(qin)和(he)純(chun)化(hua)：基(ji)於FLAG標簽(qian)與抗(kang)FLAG抗(kang)體(ti)的(de)高特(te)異(yi)性(xing)結合(he)，可利(li)用(yong)偶聯(lian)抗(kang)FLAG抗(kang)體(ti)的(de)層析柱(zhu)（如(ru)M2親(qin)和(he)樹脂(zhi)）對融合(he)蛋白(bai)進行純(chun)化(hua)。與His標簽(qian)相比，FLAG標簽(qian)的(de)純(chun)化(hua)條件(jian)更溫和(he)（通常(chang)用(yong)中(zhong)性(xing)緩沖(chong)液洗脫），能(neng)更好(hao)地(di)保(bao)持(chi)蛋白(bai)的(de)天然構象和(he)活(huo)性(xing)。  

洗脫時(shi)可通過加(jia)入(ru)FLAG肽(tai)段（競(jing)爭(zheng)性(xing)結合(he)抗(kang)體(ti)）或(huo)調(tiao)整(zheng)pH（如(ru)酸(suan)性(xing)條件(jian)）實現，避(bi)免高濃(nong)度(du)咪唑等(deng)變(bian)性(xing)劑對蛋白(bai)的(de)影響，尤其適(shi)合(he)對活(huo)性(xing)敏感的(de)蛋白(bai)。  

共純(chun)化(hua)與相互(hu)作用(yong)研(yan)究(jiu)：若目(mu)的(de)蛋白(bai)與其(qi)他(ta)蛋(dan)白(bai)存(cun)在(zai)相互(hu)作用(yong)，通(tong)過(guo)純(chun)化(hua)FLAG標簽(qian)融合(he)蛋白(bai)，可共純(chun)化(hua)其結(jie)合(he)的(de)蛋白(bai)復合(he)物(wu)，進而鑒(jian)定蛋(dan)白(bai)間(jian)的(de)相互(hu)作用(yong)（如(ru)通(tong)過(guo)質(zhi)譜(pu)分(fen)析復合(he)物(wu)成分）。  

3.蛋白(bai)功能(neng)研究(jiu)  

蛋白(bai)追蹤：在(zai)動(dong)態(tai)實(shi)驗中（如(ru)蛋(dan)白(bai)合(he)成與降解(jie)、細(xi)胞內轉運(yun)），FLAG標簽(qian)可(ke)作為“分子標記”，通(tong)過(guo)抗(kang)體(ti)檢(jian)測(ce)追蹤蛋白(bai)的(de)時空變(bian)化(hua)，研究(jiu)其代(dai)謝(xie)動力學(xue)。  

功能(neng)驗證：由於(yu)FLAG標簽(qian)較短(duan)（8個氨基(ji)酸(suan)），對(dui)融合(he)蛋白(bai)的(de)空間(jian)結構(gou)和(he)生(sheng)物(wu)學(xue)功(gong)能(neng)影(ying)響較小(xiao)（相較於(yu)長(chang)標簽(qian)），因(yin)此(ci)常(chang)用(yong)於(yu)驗(yan)證(zheng)重組蛋(dan)白(bai)是否(fou)保(bao)留(liu)天然活(huo)性(xing)（如酶活(huo)、信(xin)號傳(chuan)導(dao)功能等(deng)）。  

基(ji)因(yin)編輯(ji)輔助(zhu)：在(zai)CRISPR/Cas9等(deng)基(ji)因(yin)編輯(ji)技術(shu)中，可通(tong)過(guo)同(tong)源(yuan)重組將(jiang)FLAG標簽(qian)敲(qiao)入(ru)內(nei)源(yuan)基(ji)因(yin)的(de)開(kai)放(fang)閱(yue)讀框（ORF），實現內(nei)源(yuan)性(xing)蛋白(bai)的(de)標記，避(bi)免(mian)外源(yuan)過(guo)表達(da)對細(xi)胞(bao)的(de)幹(gan)擾(rao)，更真(zhen)實地反映(ying)蛋(dan)白(bai)的(de)生(sheng)理功(gong)能。