ELISA技術(shu)的基本(ben)原理是抗原或(huo)抗體通(tong)過(guo)特異性(xing)結(jie)合(he),形成(cheng)抗原-抗體復合(he)物(wu)。壹步法ELISA試(shi)劑(ji)盒則(ze)是(shi)在傳(chuan)統(tong)的ELISA檢(jian)測(ce)流(liu)程(cheng)的(de)基礎上,簡(jian)化了(le)步驟(zhou),減少了反應(ying)時(shi)間(jian)和(he)操(cao)作(zuo)環(huan)節。其核(he)心(xin)原理仍然(ran)是(shi)通(tong)過(guo)酶標(biao)記(ji)物(wu)與抗原或(huo)抗體結(jie)合(he),酶催(cui)化底物(wu)反(fan)應(ying)後(hou)生(sheng)成(cheng)可(ke)測(ce)量(liang)的(de)信(xin)號。

具(ju)體過程(cheng)通(tong)常(chang)包(bao)括(kuo)以(yi)下(xia)幾個(ge)步驟(zhou):
1.抗原或(huo)抗體固定(ding):在(zai)微(wei)孔(kong)板(ban)的孔(kong)內(nei),先(xian)將(jiang)已知(zhi)的(de)抗原或(huo)抗體固定(ding)。
2.樣本加(jia)入(ru):加(jia)入(ru)待測(ce)樣本(如(ru)血清(qing)、尿(niao)液(ye)等),其中(zhong)的目標(biao)物(wu)質(zhi)與固(gu)定(ding)在(zai)孔(kong)內(nei)的(de)抗原或(huo)抗體發生(sheng)特異性(xing)結(jie)合(he)。
3.酶標(biao)記(ji)抗體加(jia)入(ru):在壹(yi)步法(fa)ELISA中(zhong),通(tong)常(chang)只需(xu)要加(jia)入(ru)壹種(zhong)酶標(biao)記(ji)抗體或(huo)酶標(biao)記(ji)抗原,它能夠同(tong)時(shi)與樣本中(zhong)的目標(biao)物(wu)質(zhi)和微孔(kong)板(ban)上的(de)固定(ding)物(wu)質(zhi)反應(ying)。
4.底物(wu)反(fan)應(ying):加(jia)入(ru)底物(wu)溶(rong)液,酶催(cui)化底物(wu)發生(sheng)反應(ying),生(sheng)成(cheng)可(ke)測(ce)量(liang)的(de)信(xin)號,常見(jian)的信(xin)號包(bao)括(kuo)顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)、熒光(guang)或(huo)發光(guang)。
5.結(jie)果(guo)讀取:使用(yong)酶標(biao)儀(yi)或(huo)其(qi)他相關(guan)設(she)備測(ce)定(ding)反(fan)應(ying)後(hou)的(de)信(xin)號(hao)強(qiang)度,從而(er)計算目(mu)標(biao)物(wu)質(zhi)的濃(nong)度(du)。
壹步法ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)優(you)勢(shi):
1.簡化操作(zuo)流程(cheng):與傳(chuan)統(tong)的ELISA方法相比(bi),操作(zuo)更加(jia)簡(jian)便(bian),省略(lve)了(le)多次(ci)洗(xi)滌(di)和(he)加(jia)標(biao)的過(guo)程(cheng),減少了人(ren)為操(cao)作(zuo)的(de)錯誤(wu)和(he)時(shi)間(jian)浪(lang)費。
2.節省時(shi)間(jian):通(tong)常(chang)只需(xu)要在(zai)短(duan)時(shi)間(jian)內(nei)完(wan)成(cheng),通(tong)常(chang)整(zheng)個(ge)實(shi)驗(yan)的完(wan)成(cheng)時(shi)間(jian)可(ke)縮(suo)短(duan)至1小(xiao)時(shi)以(yi)內(nei),適合(he)急(ji)需(xu)結(jie)果(guo)的臨床(chuang)檢(jian)測(ce)。
3.高(gao)靈敏度(du):通(tong)過(guo)優(you)化試(shi)劑(ji)的設(she)計和反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian),能夠提供與傳(chuan)統(tong)ELISA試(shi)劑(ji)盒相(xiang)媲(pi)美甚至更高(gao)的靈敏度(du),能夠檢(jian)測(ce)低濃(nong)度(du)的(de)目標物(wu)質(zhi)。
4.減少試(shi)劑(ji)消耗(hao):由(you)於(yu)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)的簡(jian)化(hua),反(fan)應(ying)中(zhong)的試(shi)劑(ji)消耗(hao)減少,有助於(yu)降(jiang)低檢(jian)測(ce)成(cheng)本(ben)。
5.易於自動化(hua):非(fei)常(chang)適合(he)於(yu)自動化(hua)平(ping)臺(tai)的應(ying)用(yong),適合(he)進(jin)行(xing)大規模的樣本篩(shai)查(zha)。
壹步法ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)應(ying)用(yong)領域:
1.臨床(chuang)診(zhen)斷(duan):廣泛(fan)應(ying)用(yong)於臨(lin)床(chuang)中(zhong)各(ge)種感(gan)染性疾(ji)病(bing)、免(mian)疫(yi)系統(tong)疾病(bing)以(yi)及(ji)腫瘤(liu)標誌物(wu)的(de)檢(jian)測(ce)。例(li)如(ru),在(zai)艾(ai)滋(zi)病(bing)(HIV)病(bing)毒(du)、乙肝(gan)、丙(bing)肝(gan)等病(bing)毒(du)感(gan)染的檢(jian)測(ce)中(zhong),ELISA試(shi)劑(ji)盒已經成(cheng)為不(bu)可(ke)缺(que)工具(ju)。
2.食(shi)品(pin)安全檢(jian)測(ce):食(shi)品(pin)中(zhong)的農(nong)藥(yao)殘(can)留、重(zhong)金屬(shu)汙染(ran)等物(wu)質(zhi)的檢(jian)測(ce),通(tong)常(chang)使用(yong)ELISA技術(shu)。
3.環(huan)境(jing)監(jian)測(ce):環(huan)境(jing)中(zhong)汙染物(wu)的(de)監(jian)測(ce)(如(ru)水(shui)源中(zhong)的病(bing)原微生物(wu)或(huo)有害(hai)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)),也(ye)可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)ELISA試(shi)劑(ji)盒進(jin)行快(kuai)速(su)檢(jian)測(ce)。
4.藥(yao)物(wu)篩(shai)選與研(yan)究(jiu):在(zai)藥(yao)物(wu)研(yan)發過(guo)程(cheng)中(zhong),可用(yong)於篩(shai)選藥(yao)物(wu)的(de)活性,尤其(qi)是(shi)針(zhen)對(dui)某(mou)些(xie)特定(ding)靶(ba)標(biao)的(de)藥(yao)物(wu)篩(shai)選。