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          GST標簽(qian)蛋(dan)白(bai):分子生(sheng)物學中(zhong)的高效純(chun)化工(gong)具(ju)

          更(geng)新(xin)時(shi)間(jian):2025-07-31點擊次數:174
            GST標簽(qian)蛋(dan)白(bai)(谷胱甘(gan)肽-S轉(zhuan)移酶標簽(qian)蛋(dan)白(bai))是壹(yi)種廣泛應(ying)用於分子生(sheng)物學中(zhong)的融合標簽(qian),用(yong)於重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)的表(biao)達、純(chun)化和鑒定。GST(GlutathioneS-transferase)本身(shen)是壹(yi)種具(ju)有(you)酶(mei)活(huo)性(xing)的蛋(dan)白(bai)質,能(neng)夠(gou)結(jie)合谷胱甘(gan)肽,並(bing)在(zai)多(duo)種生(sheng)物體(ti)內(nei)參與解(jie)毒反(fan)應(ying)。將GST與目標蛋(dan)白(bai)融合後(hou),能(neng)夠(gou)通過(guo)其親(qin)和力(li)與谷(gu)胱甘(gan)肽結(jie)合,簡(jian)化蛋(dan)白(bai)的純(chun)化過(guo)程,廣泛應(ying)用於蛋(dan)白(bai)表達與純(chun)化系(xi)統中(zhong)。
            GST標簽(qian)蛋(dan)白(bai)通常(chang)由兩個(ge)部分組(zu)成(cheng):目標蛋(dan)白(bai)和GST融合標簽(qian)。GST作(zuo)為(wei)標簽(qian),通常(chang)具(ju)有(you)較(jiao)高的親(qin)和力(li)與谷(gu)胱甘(gan)肽結(jie)合,能夠(gou)將融合蛋(dan)白(bai)特(te)異性(xing)地(di)吸附到含有谷胱甘(gan)肽的親(qin)和樹(shu)脂上(shang)。目標蛋(dan)白(bai)與GST標簽(qian)融合後(hou),可(ke)以(yi)通過(guo)親和層(ceng)析(xi)法從復雜的蛋(dan)白(bai)混合物中純(chun)化出(chu)來(lai)。
            這種系統的壹(yi)個優(you)勢是GST標簽(qian)不僅有(you)助(zhu)於純(chun)化,還(hai)能幫(bang)助(zhu)目標蛋(dan)白(bai)在表(biao)達系(xi)統中(zhong)的穩(wen)定性(xing)。通過(guo)這種方式,即(ji)使(shi)目標蛋(dan)白(bai)較難表(biao)達或(huo)容(rong)易(yi)降(jiang)解(jie),GST標簽(qian)仍能提供(gong)壹(yi)定的保(bao)護作用,保(bao)證(zheng)目標蛋(dan)白(bai)的高產(chan)量和活(huo)性(xing)。
           

           

            應(ying)用:
            1.蛋(dan)白(bai)表達與純(chun)化
            在(zai)蛋(dan)白(bai)質工(gong)程和生(sheng)物化學研(yan)究(jiu)中,GST標簽(qian)常(chang)用於重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)的表(biao)達與純(chun)化。通常(chang)通過(guo)基因(yin)工(gong)程技(ji)術(shu)將GST基因(yin)與目標蛋(dan)白(bai)的基因(yin)融合,並在大(da)腸(chang)桿菌或(huo)酵(jiao)母中進(jin)行表(biao)達。之(zhi)後(hou),利(li)用谷胱甘(gan)肽親(qin)和層(ceng)析(xi)法對(dui)融合蛋(dan)白(bai)進行純(chun)化。這種方法簡(jian)單(dan)、高效,是實(shi)驗(yan)室(shi)常用(yong)的蛋(dan)白(bai)純(chun)化技(ji)術(shu)。
            2.蛋(dan)白(bai)相互(hu)作(zuo)用研(yan)究(jiu)
            由於GST標簽(qian)具(ju)有(you)較(jiao)強(qiang)的親(qin)和力(li),GST融合蛋(dan)白(bai)可以(yi)用來(lai)研(yan)究(jiu)目標蛋(dan)白(bai)與其(qi)他蛋(dan)白(bai)的相(xiang)互作用。通過(guo)與谷(gu)胱甘(gan)肽標記的親(qin)和樹(shu)脂結合,可以(yi)將目標蛋(dan)白(bai)及其(qi)結(jie)合的蛋(dan)白(bai)壹(yi)起(qi)從細胞(bao)裂解(jie)液中(zhong)分離出(chu)來(lai),從而進行進(jin)壹(yi)步的相(xiang)互作用分析(xi)。
            3.免(mian)疫學研(yan)究(jiu)
            由於本身(shen)具(ju)有(you)免(mian)疫原性(xing),因(yin)此在(zai)免(mian)疫學中(zhong)常用(yong)於抗(kang)體(ti)的產(chan)生(sheng)和分析(xi)。通過(guo)註(zhu)射GST融合蛋(dan)白(bai),能夠(gou)誘導(dao)宿主(zhu)產(chan)生(sheng)特(te)異性(xing)的抗(kang)GST抗(kang)體(ti),這對(dui)研究(jiu)蛋(dan)白(bai)質的表(biao)達、定(ding)位(wei)及功(gong)能(neng)具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)意義(yi)。
            GST標簽(qian)蛋(dan)白(bai)的優(you)點:
            1.高效純(chun)化:可(ke)通過(guo)簡(jian)單(dan)的親(qin)和層(ceng)析(xi)方法(fa)高效純(chun)化目標蛋(dan)白(bai)。
            2.提高穩定(ding)性(xing):有助(zhu)於提高目標蛋(dan)白(bai)的穩(wen)定性(xing),避免(mian)其在表達過(guo)程中(zhong)降解(jie)。
            3.應(ying)用廣泛:適(shi)用於多(duo)種表達系(xi)統(如(ru)大(da)腸(chang)桿菌、昆蟲(chong)細胞(bao)和哺(bu)乳動物細(xi)胞(bao))。
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