dsRNA | 病毒(du)感染的(de)標誌(zhi)

dsRNA（double-stranded RNA）即(ji)雙(shuang)鏈RNA，由兩條互補(bu)的(de)核苷(gan)酸(suan)鏈通過堿基(ji)配對(dui)形成，它(ta)在調(tiao)控(kong)基(ji)因表(biao)達、激活免疫(yi)反應(ying)以(yi)及RNA幹擾(rao)技(ji)術中(zhong)扮演(yan)著(zhe)關(guan)鍵(jian)角色。dsRNA也(ye)是(shi)某些病毒(du)的(de)遺傳物(wu)質，能(neng)夠觸發(fa)宿主(zhu)細(xi)胞的(de)天然(ran)免(mian)疫(yi)反應(ying)。

dsRNA的(de)形成機(ji)制(zhi)

第壹(yi)種(zhong)機(ji)制(zhi)：基(ji)於T7 RNA聚(ju)合酶(mei)（T7 RNAP）本身(shen)具有的(de)RNA依(yi)賴性(xing)RNA聚合(he)酶(mei)（RdRp）活性(xing)，能夠(gou)以產(chan)物(wu)RNA為模板，3'末端繼續(xu)延(yan)伸RNA後(hou)與(yu)原(yuan)RNA分(fen)子(zi)反向互補(bu)配對(dui)形成發(fa)卡(ka)結構；或(huo)者(zhe)是(shi)在轉(zhuan)錄(lu)過程中(zhong)，隨機(ji)斷裂的(de)/不完整的(de)轉錄(lu)產(chan)物(wu)與mRNA互補(bu)配對(dui)從(cong)而延(yan)伸成不完整的(de)雙鏈RNA。

第二(er)種(zhong)機(ji)制(zhi)：以DNA反義鏈為模板，獨立於(yu)啟(qi)動(dong)子的(de)轉錄(lu)過程形成dsRNA

圖1 dsRNA復(fu)制(zhi)示意圖(tu)

dsRNA經典克隆(long)

J2克隆(long)

J2單(dan)克隆(long)抗(kang)體（Anti-dsRNA mAb J2）是(shi)dsRNA檢測(ce)的(de)金(jin)標準(zhun)，具(ju)有高(gao)度特(te)異性(xing)。它(ta)最(zui)初用(yong)於植(zhi)物(wu)病毒(du)的(de)研究(jiu)，但自(zi)從(cong)Weber等人在2006年的(de)開創(chuang)性(xing)論文(wen)發(fa)表(biao)以來(lai)，J2被(bei)用(yong)來(lai)證明所(suo)有(you)正(zheng)鏈RNA病毒(du)在感染的(de)細(xi)胞中(zhong)產(chan)生的(de)大量dsRNA。

K2克隆(long)

K2單(dan)克隆(long)抗(kang)體（Anti-dsRNA mAb K2）是(shi)另壹(yi)種抗(kang)dsRNA的(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)體，主(zhu)要用(yong)於ELISA和(he)夾心法ELISA實(shi)驗(yan)，K2主要用(yong)於ELISA和(he)夾心法ELISA，在高(gao)背(bei)景(jing)環(huan)境中(zhong)仍(reng)能精準(zhun)識別(bie)dsRNA，尤其在高(gao)濃(nong)度L-dsRNA和(he)長(chang)時(shi)間(jian)孵育(yu)條(tiao)件(jian)下(xia)，顯(xian)示出對(dui)天然(ran)dsRNA結合(he)能(neng)力(li)較強(qiang)的(de)特(te)性(xing)。

dsRNA的(de)生物(wu)學意(yi)義

1. dsRNA通(tong)常被視為病毒(du)感染的(de)標誌(zhi)，因為許多病毒(du)（尤其是雙鏈RNA病毒(du)）以dsRNA作(zuo)為其基(ji)因組(zu)或(huo)復(fu)制(zhi)中(zhong)間(jian)體(ti)。例如(ru)正(zheng)鏈RNA病毒(du)（+ssRNA）在復(fu)制(zhi)時會(hui)先合(he)成負鏈RNA（-ssRNA），形成dsRNA，然後(hou)再從(cong)負鏈RNA合成更多的(de)正鏈RNA。

圖2 病毒(du)感染後(hou)產(chan)生的(de)dsRNA被RIG-I、MDA5和(he)TLR3等(deng)受(shou)體(ti)識別(bie)，觸發(fa)IFN-β的(de)產(chan)生，進(jin)而(er)激(ji)活(huo)ISGs，包括OAS和(he)IFN-α，形成抗病毒(du)反應(ying)的(de)正反饋循環(huan)。抗(kang)IFN-α抗(kang)體(ti)中(zhong)和(he)IFN-α，抑(yi)制(zhi)ISGs的(de)誘導(dao)，削弱免疫反應(ying)，影(ying)響(xiang)病毒(du)清(qing)除(chu)。

2. 在mRNA疫(yi)苗(miao)和(he)治(zhi)療(liao)中(zhong)，dsRNA作(zuo)為副(fu)產(chan)物(wu)在體(ti)外(wai)轉錄(lu)（IVT, In Vitro Transcription）制(zhi)備mRNA過程中(zhong)產(chan)生，能(neng)夠被(bei)細(xi)胞內的(de)核酸(suan)受體識別(bie)，例如(ru)TLR3、MDA5或(huo)者(zhe)RIG-I，進(jin)而(er)引發(fa)天然(ran)免(mian)疫(yi)炎(yan)癥(zheng)反應(ying)。

圖(tu)3 在 IVT 反應(ying)過(guo)程中(zhong)形成 3′-延伸(shen)的(de) RNA 副(fu)產(chan)物(wu)。（A） 使(shi)用(yong) dsRNA 特(te)異性(xing)抗體(ti) （J2） 對(dui)三種不同的(de) mRNA 序(xu)列（CLuc、RFP 和(he) GFP）進(jin)行(xing) dsRNA檢測(ce)。

3. 免(mian)疫(yi)信號通路(lu)中(zhong)，dsRNA作(zuo)為重(zhong)要的(de)病原(yuan)分(fen)子(zi)模式（PAMPs），能夠(gou)激(ji)活天然(ran)免(mian)疫(yi)系(xi)統中(zhong)的(de)關鍵(jian)受體（如(ru)RIG-I、MDA5和(he)TLR3）。這些(xie)受體(ti)通過(guo)識別(bie)dsRNA，引發(fa)幹擾(rao)素(su)（IFN）等抗病毒(du)分(fen)子(zi)的(de)產(chan)生，從(cong)而觸發(fa)強(qiang)大的(de)免疫(yi)反應(ying)。

dsRNA結合(he)後(hou)，NLRP1觸發(fa)其UPA和(he)CARD結構域的(de)釋(shi)放，組(zu)裝(zhuang)炎癥(zheng)體(ti)種(zhong)子(zi)，誘(you)導炎癥(zheng)體(ti)形成並(bing)激(ji)活caspase 1。激活的(de)caspase 1切割(ge)炎癥(zheng)細(xi)胞因子(zi)前體（如IL-1β和(he)IL-18）和(he)壹(yi)個(ge)形成孔洞(dong)的(de)蛋白(bai)gasdermin D（GSDMD）。GSDMD孔洞在質(zhi)膜(mo)上形成，誘導(dao)焦(jiao)亡(wang)，這是(shi)壹種(zhong)炎癥(zheng)形式的(de)細(xi)胞死亡(wang)。

圖4 dsRNA作(zuo)為觸發(fa)RIG-I（Retinoic Acid-Inducible Gene I）和(he)MDA5（Melanoma Differentiation-Associated Protein 5）識別(bie)的(de)分(fen)子(zi)模式，從而(er)啟(qi)動(dong)先天免(mian)疫(yi)反應(ying)。

dsRNA不僅(jin)在理解(jie)病毒(du)感染機(ji)制(zhi)和(he)宿主(zhu)免(mian)疫(yi)反應(ying)中(zhong)扮演(yan)著(zhe)關(guan)鍵(jian)角色，而且在開(kai)發(fa)新(xin)的(de)抗病毒(du)策略(lve)和(he)疫(yi)苗(miao)技(ji)術(shu)方(fang)面(mian)具(ju)有(you)重(zhong)要價值(zhi)。通過對(dui)dsRNA的(de)形成機(ji)制(zhi)、識別(bie)受體(ti)以(yi)及其在免(mian)疫(yi)激活(huo)中(zhong)的(de)作(zuo)用(yong)的(de)深入(ru)研(yan)究(jiu)，科(ke)學(xue)家(jia)們能夠更好(hao)地理解(jie)病毒(du)如何逃避(bi)或(huo)操(cao)縱(zong)宿主(zhu)的(de)天然(ran)免(mian)疫(yi)反應(ying)，以(yi)及如何設(she)計(ji)更有效的(de)疫苗(miao)和(he)治(zhi)療(liao)藥物(wu)來(lai)對(dui)抗(kang)病毒(du)感染。

兔單(dan)克隆(long)抗(kang)體優(you)勢

斯(si)達特(te)上架(jia)抗dsRNA抗(kang)體(ti)，引用(yong)經典克隆(long)J2和(he)K2，高(gao)批間(jian)壹(yi)致性(xing)和(he)高(gao)靈(ling)敏度；還有(you)更多相關的(de)高(gao)純(chun)度、高(gao)活(huo)性(xing)蛋白(bai)，為廣(guang)大客戶(hu)提(ti)供高(gao)品(pin)質抗體(ti)蛋(dan)白。