FITC-Labeled Siglec-2 His Tag：B細(xi)胞(bao)檢測(ce)的(de)“經典(dian)入門探針“

該(gai)蛋(dan)白(bai)是(shi)壹種結(jie)構(gou)簡(jian)潔、功(gong)能(neng)專(zhuan)註的(de)重組(zu)融合(he)探針，其(qi)設計(ji)刪(shan)繁(fan)就簡(jian)，專註於(yu)滿(man)足(zu)基礎(chu)檢(jian)測(ce)需求，包(bao)含三個明(ming)確(que)的(de)功(gong)能(neng)組(zu)件：

探針的(de)核心是(shi)人CD22蛋(dan)白(bai)的(de)胞外唾液(ye)酸(suan)結(jie)合(he)結構(gou)域。CD22是(shi)B細(xi)胞(bao)特(te)異性的(de)抑制性(xing)受體(ti)，其(qi)胞外域能(neng)特(te)異性識別(bie)並結合(he)α2,6-連接(jie)的(de)唾液(ye)酸(suan)糖鏈。該(gai)模(mo)塊保留了(le)與B細(xi)胞(bao)表面(mian)天然糖蛋(dan)白(bai)（如自(zi)身(shen)BCR、CD45）上唾(tuo)液(ye)酸(suan)化修(xiu)飾(shi)結合(he)的(de)能(neng)力(li)，可(ke)作(zuo)為B細(xi)胞(bao)表面(mian)特(te)定糖基(ji)化狀態的(de)"探針"。

融(rong)合(he)的(de)多聚(ju)組(zu)氨(an)酸(suan)標(biao)簽，主要承(cheng)擔兩大基礎(chu)功(gong)能(neng)：

便(bian)捷(jie)的(de)壹步(bu)純化：通過鎳親(qin)和(he)層(ceng)析(xi)，實現低(di)成(cheng)本、高(gao)效(xiao)率(lv)的(de)蛋白(bai)生產(chan)和(he)純化，確(que)保(bao)批(pi)次(ci)間(jian)的(de)壹致(zhi)性(xing)和(he)活(huo)性(xing)，這是(shi)其(qi)能(neng)夠保(bao)持(chi)經濟(ji)性(xing)的(de)關鍵(jian)。

基礎(chu)的(de)固(gu)定化能(neng)力(li)：便於(yu)將(jiang)探針固(gu)定於(yu)鎳包(bao)被(bei)的(de)板條(tiao)或芯(xin)片，用(yong)於(yu)開發(fa)簡(jian)單的(de)ELISA檢測(ce)或進(jin)行初(chu)步(bu)的(de)結合(he)動力(li)學分(fen)析(xi)。

通過穩定的(de)共價鍵(jian)將(jiang)異硫氰酸(suan)熒光素連(lian)接(jie)到蛋白(bai)上。FITC在488 nm激(ji)光激(ji)發下(xia)發出綠(lv)色(se)熒光，其(qi)作為經典(dian)選(xuan)擇(ze)的(de)優(you)勢在於(yu)：

設備普(pu)適(shi)性：從最(zui)基(ji)礎(chu)的(de)教學(xue)級(ji)流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)到臨(lin)床分析(xi)儀(yi)，從普(pu)通熒光顯微(wei)鏡(jing)到共聚(ju)焦系統，兼容FITC檢(jian)測(ce)通道，確(que)保(bao)了(le)方(fang)法的(de)可(ke)移(yi)植性(xing)和(he)普及性。

實驗(yan)門檻與成本：FITC標記(ji)的(de)試劑(ji)成本通常(chang)低(di)，且(qie)操(cao)作(zuo)流(liu)程成熟簡(jian)單，非(fei)常適(shi)合(he)預算(suan)有(you)限(xian)的(de)實驗(yan)室(shi)、大批(pi)量初(chu)篩(shai)實驗(yan)或(huo)本科/研(yan)究生教(jiao)學(xue)。

豐富的(de)對照(zhao)與參考(kao)數據：數十年的(de)應用(yong)積(ji)累(lei)了(le)海量的(de)實驗(yan)參數（如電(dian)壓(ya)、補償(chang)值），便(bian)於(yu)新(xin)手快(kuai)速上(shang)手並比(bi)對(dui)結果(guo)。

此(ci)探(tan)針是(shi)B細(xi)胞(bao)研(yan)究領域的(de)"基礎(chu)教(jiao)學(xue)工(gong)具"和(he)"標(biao)準化工(gong)作馬"。CD22結合(he)域是(shi)識(shi)別(bie)B細(xi)胞(bao)表面(mian)特(te)定糖基(ji)化"簽名(ming)"的(de)"標準(zhun)量尺(chi)"；FITC是(shi)將(jiang)測(ce)量結(jie)果(guo)以通用(yong)、經濟(ji)的(de)"綠色(se)讀(du)數"呈現(xian)的(de)"經典(dian)顯示屏"；而His標簽則是(shi)保(bao)證(zheng)這把"量尺(chi)"能(neng)夠被(bei)穩(wen)定、標(biao)準化生產(chan)的(de)"簡(jian)易校(xiao)準手柄(bing)"。其(qi)目標是(shi)成(cheng)為每(mei)個免疫學(xue)實驗(yan)室(shi)都(dou)能(neng)配(pei)備(bei)且(qie)易(yi)於使(shi)用的(de)"標配(pei)"試劑(ji)。

該(gai)探(tan)針的(de)核心應(ying)用(yong)機制直(zhi)接(jie)明(ming)了(le)，專註於(yu)提(ti)供(gong)穩(wen)定可(ke)信(xin)的(de)壹步(bu)法檢(jian)測(ce)結果(guo)。

標記(ji)B細(xi)胞(bao)群體：當(dang)探(tan)針與淋巴(ba)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)共孵(fu)育(yu)時，在鈣離子(zi)存在下(xia)，其(qi)CD22結構(gou)域會(hui)與B細(xi)胞(bao)表面(mian)糖蛋(dan)白(bai)上的(de)α2,6-唾液(ye)酸(suan)修(xiu)飾(shi)結合(he)。由(you)於其(qi)他淋巴(ba)細(xi)胞(bao)（T細(xi)胞(bao)、NK細(xi)胞(bao)）缺乏(fa)豐(feng)富的(de)此類修(xiu)飾(shi)，從而實現對(dui)B細(xi)胞(bao)群體的(de)有(you)效(xiao)標(biao)記(ji)和(he)圈門。

反映(ying)B細(xi)胞(bao)糖基(ji)化狀態：結合(he)熒光強(qiang)度不僅(jin)能(neng)指(zhi)示CD22配體的(de)豐度(du)，間(jian)接(jie)反映(ying)B細(xi)胞(bao)活(huo)化狀態（活(huo)化B細(xi)胞(bao)糖基(ji)化模式(shi)會(hui)改(gai)變(bian)），更(geng)可(ke)作(zuo)為研(yan)究B細(xi)胞(bao)表面(mian)糖基(ji)化生物(wu)學(xue)的(de)簡(jian)易工(gong)具。

操(cao)作(zuo)極(ji)簡(jian)：孵育(yu)-洗滌(di)-上機，三步(bu)完成(cheng)。無(wu)需二抗，極(ji)大縮短(duan)了(le)實驗(yan)時間(jian)，降(jiang)低(di)了(le)因(yin)多步(bu)操(cao)作(zuo)帶(dai)來(lai)的(de)變(bian)異和背景。

結(jie)果(guo)穩定可(ke)靠：直(zhi)接(jie)標記(ji)避(bi)免了(le)二抗批(pi)次(ci)差異和交叉(cha)反應(ying)可(ke)能(neng)帶(dai)來(lai)的(de)影(ying)響，結果(guo)更加(jia)直接(jie)反映(ying)CD22配體(ti)的(de)結合(he)情況(kuang)。

適用(yong)於胞(bao)內(nei)染(ran)色(se)後的(de)表面(mian)標(biao)記(ji)：在需要進(jin)行胞(bao)內(nei)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)或核蛋白(bai)染色(se)的(de)實驗(yan)中(zhong)，進(jin)行固(gu)定破(po)膜步(bu)驟可(ke)能(neng)會(hui)破壞(huai)許多表面(mian)抗(kang)原的(de)表位(wei)，但(dan)FITC的(de)熒光信(xin)號(hao)相對(dui)穩(wen)定，且(qie)該(gai)探(tan)針的(de)結合(he)基於(yu)糖識(shi)別而非(fei)單壹蛋白(bai)表位(wei)，有(you)時在溫(wen)和(he)固(gu)定後仍(reng)能(neng)使(shi)用，為多(duo)色(se)實驗(yan)提(ti)供(gong)更(geng)多(duo)可(ke)能(neng)（需優(you)化條(tiao)件）。

可(ke)用(yong)於(yu)初(chu)步(bu)的(de)細(xi)胞(bao)分選(xuan)：結合(he)流式(shi)分(fen)選(xuan)儀(yi)，可(ke)以分選(xuan)FITC陽(yang)性的(de)B細(xi)胞(bao)群體，用(yong)於(yu)後續培(pei)養或分(fen)析(xi)。

該(gai)探(tan)針是(shi)滿(man)足(zu)日常(chang)B細(xi)胞(bao)相關研(yan)究和基礎(chu)臨(lin)床檢測(ce)需求的(de)實用工(gong)具。

淋巴(ba)細(xi)胞(bao)亞群(qun)基礎(chu)分(fen)型：與FITC-CD3、PE-CD19等抗(kang)體(ti)組(zu)合(he)，用於(yu)本科或(huo)研(yan)究生實驗(yan)教(jiao)學(xue)，教(jiao)授(shou)學生掌握(wo)流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)術圈門邏輯(ji)，理解(jie)T、B、NK細(xi)胞(bao)的(de)基本區分(fen)。

B細(xi)胞(bao)發育(yu)與活(huo)化基礎(chu)研(yan)究：用於分析(xi)不同(tong)組(zu)織（骨(gu)髓、脾(pi)臟、淋巴(ba)結(jie)）或(huo)不同(tong)刺(ci)激(ji)條(tiao)件下(xia)B細(xi)胞(bao)群體的(de)大小和比(bi)例變(bian)化。

外周血(xue)淋巴(ba)細(xi)胞(bao)亞群(qun)分析(xi)：在醫院(yuan)檢(jian)驗(yan)科或(huo)基礎(chu)臨(lin)床研(yan)究中，作為B細(xi)胞(bao)計(ji)數的(de)補充(chong)或驗(yan)證(zheng)方(fang)法。雖(sui)然(ran)CD19抗體(ti)更常用，但該(gai)探(tan)針提供(gong)了(le)基於(yu)B細(xi)胞(bao)功(gong)能(neng)特(te)性（特(te)定糖基(ji)化）的(de)替代檢(jian)測(ce)視(shi)角。

慢性淋巴(ba)細(xi)胞(bao)白(bai)血病等B細(xi)胞(bao)腫瘤(liu)的(de)初篩(shai)：可(ke)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)CLL等疾(ji)病(bing)中B細(xi)胞(bao)群體的(de)擴增。其(qi)結合(he)模式(shi)可(ke)能(neng)與CD19抗體(ti)不同(tong)，有(you)時能(neng)提(ti)供(gong)額(e)外的(de)信(xin)息(xi)。

免疫缺陷(xian)病篩(shai)查：輔助(zhu)評(ping)估(gu)原發性或(huo)繼發(fa)性免疫缺陷(xian)患者(zhe)外周血(xue)B細(xi)胞(bao)數量。

免疫抑(yi)制劑(ji)對B細(xi)胞(bao)影(ying)響的(de)初步(bu)評估(gu)：在藥(yao)物(wu)安全性評價或(huo)免疫藥(yao)效(xiao)學(xue)研(yan)究中，快速評估(gu)候(hou)選(xuan)化合(he)物對(dui)動物(wu)或(huo)人外周血(xue)B細(xi)胞(bao)比(bi)例的(de)影(ying)響。

糖生物(wu)學(xue)相關藥(yao)物(wu)研(yan)究工(gong)具：作(zuo)為靶(ba)向唾(tuo)液酸(suan)-Siglec通路(lu)的(de)藥(yao)物(wu)（如用(yong)於(yu)自身(shen)免疫病(bing)或炎(yan)癥）的(de)體外結合(he)或競(jing)爭(zheng)實驗(yan)工(gong)具。

研(yan)究唾液酸(suan)酶(mei)或糖基(ji)化抑制劑(ji)的(de)作用(yong)：處(chu)理細(xi)胞(bao)（如用(yong)唾(tuo)液酸(suan)酶(mei)去(qu)除(chu)末端(duan)唾(tuo)液(ye)酸(suan)，或(huo)用糖基(ji)化抑制劑(ji)）後，使(shi)用該(gai)探(tan)針檢測(ce)結合(he)信(xin)號(hao)的(de)變(bian)化，是(shi)研(yan)究蛋白(bai)質(zhi)糖基(ji)化功(gong)能(neng)及(ji)其(qi)調控(kong)的(de)簡(jian)易入(ru)門實驗(yan)。

在技(ji)術快(kuai)速發展的(de)背景下(xia)，這壹經典(dian)探針的(de)價值並未(wei)褪色(se)，而是(shi)在特(te)定領域持續發(fa)光。

由(you)於其(qi)生產(chan)的(de)標準(zhun)化和信(xin)號(hao)的(de)穩定性(xing)，可(ke)作(zuo)為實驗(yan)室(shi)內(nei)部(bu)或跨實驗(yan)室(shi)流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)術標準(zhun)化和質(zhi)量控(kong)制的(de)參照(zhao)探針，用於(yu)監測(ce)儀(yi)器狀態和染色(se)流程的(de)穩定性(xing)。

其(qi)低(di)成(cheng)本和高(gao)普(pu)適(shi)性，特(te)別是(shi)在資(zi)源有(you)限(xian)的(de)科研(yan)機構(gou)，推(tui)廣(guang)和普及B細(xi)胞(bao)基礎(chu)免疫學(xue)研(yan)究，提升(sheng)科學(xue)研(yan)究的(de)可(ke)及(ji)性(xing)和(he)數據的(de)可(ke)比(bi)性(xing)。

在日益(yi)流(liu)行(xing)的(de)線(xian)上虛(xu)擬實驗(yan)課(ke)程或模(mo)擬實驗(yan)中(zhong)，FITC-CD22探(tan)針因(yin)其(qi)經典(dian)性，常被(bei)選(xuan)作演(yan)示流式細(xi)胞(bao)術原理(li)和(he)數據分析(xi)的(de)典型案(an)例。

當(dang)開(kai)發基於新(xin)原理(li)（如無(wu)需熒光的(de)檢測(ce)技術(shu)）的(de)B細(xi)胞(bao)檢測(ce)方(fang)法時，此探針的(de)檢測(ce)結果(guo)可(ke)作(zuo)為傳(chuan)統的(de)"熒光金標(biao)準(zhun)"之壹，用於(yu)驗(yan)證(zheng)新(xin)技術(shu)的(de)準確(que)性(xing)和可(ke)靠性(xing)。

在需要對數以萬計(ji)樣(yang)本進(jin)行基(ji)礎(chu)免疫表型分析(xi)的(de)大型隊列研(yan)究中，其(qi)經濟(ji)性(xing)、可(ke)靠性(xing)和(he)自動化兼容性(xing)使(shi)其(qi)成為壹個吸(xi)引(yin)力(li)的(de)高(gao)性(xing)價比(bi)選(xuan)擇(ze)。

FITC-Labeled Siglec-2 His Tag 是(shi)B細(xi)胞(bao)研(yan)究工(gong)具庫(ku)中(zhong)壹把樸(pu)實的(de)"經典(dian)入門鑰匙(chi)"。它(ta)舍(she)棄了(le)前沿(yan)的(de)光譜性(xing)能(neng)與復雜(za)的(de)擴展功(gong)能(neng)，轉(zhuan)而追求可(ke)靠性(xing)、經濟(ji)性(xing)和(he)普(pu)適性(xing)。這使(shi)得(de)它(ta)能(neng)夠輕(qing)松(song)走進(jin)任何(he)壹間(jian)基(ji)礎(chu)免疫學(xue)實驗(yan)室(shi)，成(cheng)為訓(xun)練科研(yan)新(xin)手，支(zhi)撐常(chang)規檢測(ce)的(de)"老(lao)夥計(ji)"，以及驗(yan)證(zheng)創(chuang)新(xin)方(fang)法的(de)"基準(zhun)尺(chi)"。從幫助(zhu)醫學(xue)生理(li)解(jie)淋巴(ba)細(xi)胞(bao)圖譜，到(dao)協(xie)助(zhu)臨(lin)床實驗(yan)室(shi)進(jin)行免疫狀態評估；從支(zhi)持(chi)藥(yao)物(wu)研(yan)發的(de)初步(bu)篩(shai)選(xuan)，到啟蒙對糖生物(wu)學(xue)感興趣的(de)初學(xue)者，這個(ge)"綠色(se)經典(dian)"始終以其(qi)最親(qin)和(he)的(de)姿態(tai)，服務(wu)於科研(yan)與教學(xue)群(qun)體。在未(wei)來(lai)，無(wu)論(lun)技術如何(he)叠代(dai)，這種(zhong)能(neng)夠降(jiang)低(di)科學(xue)探索(suo)門檻、保(bao)障(zhang)數據基礎(chu)可(ke)比(bi)性(xing)的(de)經典(dian)工(gong)具，都(dou)將(jiang)在科學(xue)普及、教(jiao)育(yu)傳承(cheng)和標準(zhun)化建(jian)設中，保(bao)有(you)永(yong)恒而獨(du)特(te)的(de)價值。