如(ru)何科(ke)學(xue)選擇高(gao)質(zhi)量的(de)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)？

壹(yi)、什麽是ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)？其(qi)技(ji)術原理(li)是什麽？

酶聯免疫吸(xi)附(fu)測定(ding)（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)壹(yi)種(zhong)基於抗(kang)原-抗(kang)體(ti)特(te)異性反應(ying)與酶催化放大系統(tong)相(xiang)結(jie)合(he)的(de)生物分析(xi)工具，用(yong)於(yu)對(dui)液體(ti)樣本(ben)中的(de)目(mu)標(biao)分子進(jin)行定(ding)性與定量(liang)檢測(ce)。其(qi)核(he)心技(ji)術原理(li)在於(yu)：將(jiang)酶標(biao)記在特(te)異性抗(kang)體(ti)或抗(kang)原上(shang)，形成(cheng)酶標(biao)復(fu)合(he)物。該復(fu)合(he)物既(ji)保(bao)留免疫反(fan)應的(de)特(te)異性，又具(ju)備酶的(de)生物催化活(huo)性。在反(fan)應過程中，目標(biao)分子與固相(xiang)載體(ti)上(shang)包(bao)被的(de)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，再(zai)通過酶標(biao)抗(kang)體(ti)進(jin)行識(shi)別，最終加入底物後通過酶促反應產(chan)生顯色信號(hao)，實(shi)現(xian)對(dui)待(dai)測(ce)物的(de)高(gao)靈(ling)敏(min)度檢(jian)測(ce)。

ELISA技(ji)術自(zi)1971年由(you)Engvall和Perlmann提出以來，因(yin)其(qi)操(cao)作(zuo)簡便(bian)、靈(ling)敏(min)度高(gao)、適合(he)大批(pi)量樣本(ben)檢測(ce)等(deng)優勢(shi)，已成為生命科(ke)學(xue)研究(jiu)、臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)、藥(yao)物開(kai)發和(he)食(shi)品安全檢測(ce)等(deng)領域的(de)重(zhong)要分析(xi)手段。隨(sui)著(zhe)國(guo)家(jia)科(ke)研投(tou)入的(de)持(chi)續增加(jia)，ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)在(zai)高(gao)校(xiao)、科(ke)研院所及(ji)醫療機構(gou)中的(de)應(ying)用(yong)日益(yi)廣(guang)泛(fan)。

二(er)、ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)有(you)哪(na)些(xie)核(he)心優勢(shi)？

1.廣(guang)泛(fan)的(de)樣本(ben)適應(ying)性
可檢測(ce)血(xue)清、血漿、尿(niao)液(ye)、腦(nao)脊(ji)液、細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿等多(duo)種樣本(ben)類(lei)型(xing)，適(shi)用(yong)範圍(wei)涵(han)蓋(gai)醫學(xue)、生物學(xue)、農業及(ji)環(huan)境監(jian)測等(deng)多(duo)個領(ling)域。

2.高(gao)靈(ling)敏(min)度與特(te)異性
通過酶促放大作(zuo)用(yong)，可檢測(ce)低(di)至(zhi)pg/mL級(ji)別的(de)目(mu)標(biao)分子，且由(you)於抗(kang)原-抗(kang)體(ti)反應(ying)的(de)高(gao)度特(te)異性，能(neng)夠有效(xiao)區(qu)分結(jie)構(gou)相似的(de)分子。

3.操(cao)作(zuo)簡便(bian)且成(cheng)本(ben)可控
無(wu)需(xu)依(yi)賴昂(ang)貴(gui)的(de)大型(xing)儀(yi)器，常(chang)規實驗(yan)室均(jun)可開(kai)展(zhan)。試(shi)劑(ji)盒(he)通常(chang)提供預包被(bei)板條(tiao)和優化好(hao)的(de)試(shi)劑(ji)，流(liu)程標(biao)準(zhun)化，適合(he)高(gao)通量(liang)篩(shai)查(zha)。

4.結(jie)果(guo)穩定重(zhong)復(fu)性好
成(cheng)熟的(de)工(gong)藝(yi)控制和質(zhi)標(biao)體(ti)系保(bao)證(zheng)了試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)批(pi)間(jian)壹致性，板內(nei)與板間(jian)變(bian)異系數通常(chang)可控制在15%以內(nei)，滿足科(ke)研與診(zhen)斷(duan)的(de)重(zhong)復(fu)性要求。

三(san)、如(ru)何科(ke)學(xue)選擇適合(he)的(de)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)？

1.明(ming)確檢(jian)測種(zhong)屬(shu)與樣本(ben)類(lei)型(xing)
不(bu)同(tong)種(zhong)屬(shu)（人、小(xiao)鼠(shu)、大鼠(shu)等）的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)通常(chang)不能(neng)通用(yong)。樣本(ben)類(lei)型(xing)（如(ru)血清(qing)vs血漿、細胞上(shang)清(qing)vs組(zu)織(zhi)裂(lie)解液）也(ye)影響(xiang)稀(xi)釋(shi)液(ye)選(xuan)擇(ze)和(he)前處理(li)方式，需嚴(yan)格按說明(ming)書(shu)操(cao)作(zuo)。

2.確認檢(jian)測(ce)範圍(wei)與靈(ling)敏(min)度
標(biao)準(zhun)曲(qu)線範圍(wei)應(ying)覆(fu)蓋(gai)待測(ce)樣本(ben)的(de)實(shi)際濃度。對(dui)於(yu)高(gao)濃度樣本(ben)，需進(jin)行預實驗(yan)確定(ding)合(he)適(shi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；對(dui)低(di)豐(feng)度目(mu)標(biao)，應(ying)選擇高(gao)靈(ling)敏(min)度試(shi)劑(ji)盒(he)（如(ru)HS系列）。

3.關(guan)註(zhu)抗(kang)體(ti)對的(de)特(te)異性
優選采(cai)用(yong)雙單(dan)克隆抗(kang)體(ti)設計(ji)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)，其(qi)特(te)異性通常(chang)高(gao)於多(duo)抗(kang)-單(dan)抗(kang)組(zu)合(he)。可通過說明(ming)書(shu)提供的(de)交(jiao)叉(cha)反應數據(ju)評估(gu)其(qi)特(te)異性。

4.重視(shi)重復(fu)性與穩定性指標(biao)
重(zhong)復(fu)性可通過板(ban)內(nei)、板間變(bian)異系數（CV）評估(gu)，優質(zhi)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)CV值應(ying)低(di)於(yu)15%。同(tong)時(shi)需(xu)註(zhu)意(yi)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)有(you)效(xiao)期和儲(chu)存條(tiao)件。

5.評估(gu)操作(zuo)便(bian)捷(jie)性與時(shi)效(xiao)性
對於(yu)大批(pi)量樣本(ben)，宜選(xuan)擇(ze)反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)短、操(cao)作(zuo)步驟(zhou)簡化的(de)型(xing)號(hao)。部(bu)分試(shi)劑(ji)盒(he)還(hai)提供即(ji)用(yong)型(xing)試(shi)劑(ji)，進(jin)壹步提升實驗效(xiao)率(lv)。

6.考察品牌美(mei)譽度與文獻支持(chi)
優先(xian)選用(yong)品牌如(ru)斯達特(te)生物（STARTER）等(deng)在(zai)產(chan)品質(zhi)控和技(ji)術支持(chi)方面更(geng)具(ju)保障。試(shi)劑(ji)盒(he)是(shi)否(fou)有(you)高(gao)質(zhi)量SCI文獻引(yin)用(yong)也(ye)是(shi)重要參考指標(biao)。

四、ELISA實(shi)驗操(cao)作(zuo)中有哪(na)些(xie)關(guan)鍵註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)？

1.樣本(ben)準(zhun)備與保存
使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣本(ben)，避免溶(rong)血、細(xi)菌汙染或反(fan)復(fu)凍融。短期保存（5天內(nei)）可置(zhi)於(yu)4℃，長(chang)期保存需-80℃分裝凍存。

2.試(shi)劑(ji)平(ping)衡(heng)與預處理(li)
使用(yong)前將(jiang)所有(you)組(zu)分平衡至(zhi)室(shi)溫（約(yue)30分鐘(zhong)），避免溫度差異導致孔(kong)間反(fan)應不(bu)均。不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)得混(hun)用(yong)。

3.加(jia)樣操(cao)作(zuo)規範
樣本(ben)需垂(chui)直加入孔底，避免觸碰孔壁。高(gao)通量(liang)檢測(ce)時(shi)應(ying)分批次操作(zuo)，確保(bao)加樣時(shi)間(jian)壹(yi)致。每(mei)樣本(ben)更換吸(xi)頭以防交(jiao)叉(cha)汙染。

4.溫育(yu)與洗(xi)板控制
溫育(yu)時(shi)間(jian)和(he)溫(wen)度應(ying)嚴(yan)格按說明(ming)書(shu)設(she)置(zhi)。洗(xi)板時(shi)手(shou)工(gong)拍板需(xu)垂(chui)直用(yong)力(li)，機(ji)器洗(xi)板應定期檢查噴嘴(zui)通暢性，確保(bao)清洗(xi)充分。

5.顯色與終止(zhi)時(shi)機(ji)
TMB底物顯色需避光反(fan)應(ying)，終止(zhi)液(ye)加(jia)入後應(ying)在15分鐘(zhong)內(nei)完成讀數。酶標(biao)儀(yi)需預熱穩定後再(zai)進(jin)行檢(jian)測。

6.數據(ju)分析(xi)與質(zhi)控
標(biao)準(zhun)曲(qu)線相(xiang)關(guan)系數（R²）應(ying)大於(yu)0.99。建議每(mei)板設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)、空(kong)白孔(kong)及(ji)質(zhi)控樣本(ben)，確保(bao)結(jie)果(guo)可靠性。

五、ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)發展(zhan)趨勢(shi)如(ru)何？

隨(sui)著(zhe)精(jing)準(zhun)醫學(xue)和蛋(dan)白(bai)組(zu)學(xue)的(de)發展(zhan)，ELISA技(ji)術正向(xiang)更(geng)高(gao)靈(ling)敏(min)度、更(geng)廣(guang)檢(jian)測(ce)範圍(wei)和(he)更(geng)佳(jia)多(duo)重檢測能(neng)力(li)方向(xiang)演進(jin)。例(li)如(ru)：

1.高(gao)靈(ling)敏(min)度變(bian)體(ti)：如(ru)數字(zi)化(hua)ELISA（Simoa技(ji)術）將(jiang)檢測(ce)靈(ling)敏(min)度提升至(zhi)fg/mL級(ji)別；

2.多(duo)重檢測試(shi)劑(ji)盒(he)：通過微(wei)陣列或磁珠(zhu)編碼實(shi)現(xian)單(dan)孔(kong)內(nei)多(duo)指標(biao)同(tong)步檢測；

3.自(zi)動(dong)化整合(he)：與液體(ti)處理(li)系統(tong)聯(lian)用(yong)，實(shi)現(xian)全流(liu)程標(biao)準(zhun)化與高(gao)通量(liang)化；

4.應(ying)用(yong)領(ling)域拓展(zhan)：在細(xi)胞因(yin)子風(feng)暴監(jian)測、生物標(biao)誌(zhi)物發現(xian)、藥(yao)物動(dong)力(li)學(xue)研究(jiu)中發揮(hui)更大作(zuo)用(yong)。

結(jie)語(yu)

ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)作(zuo)為(wei)經典(dian)且成(cheng)熟(shu)的(de)免疫檢(jian)測工(gong)具，其(qi)選(xuan)擇(ze)與使用(yong)的(de)科(ke)學(xue)性直接(jie)關(guan)系到(dao)實(shi)驗數據(ju)的(de)可靠性。科(ke)研工作(zuo)者應在(zai)明(ming)確檢(jian)測需(xu)求的(de)基(ji)礎(chu)上(shang)，從(cong)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)原理(li)、性能(neng)參數、品牌信(xin)譽和(he)操作(zuo)便(bian)利(li)性等多(duo)維度進(jin)行綜合(he)評估(gu)。規範的(de)實(shi)驗(yan)操作(zuo)與嚴格的(de)質(zhi)量控制，結(jie)合(he)不(bu)斷(duan)優化的(de)產(chan)品技(ji)術，將(jiang)推動(dong)ELISA在生命科(ke)學(xue)研究(jiu)和臨(lin)床(chuang)應用(yong)中持(chi)續發揮(hui)重要作(zuo)用(yong)。

產(chan)品信息(xi)

杭(hang)州斯達特(te)誌在(zai)為全球生命科(ke)學(xue)行業提供優質(zhi)的(de)抗(kang)體(ti)、蛋(dan)白(bai)、試(shi)劑(ji)盒(he)等(deng)產(chan)品及(ji)研發服務(wu)。依(yi)托(tuo)多(duo)個開(kai)發平(ping)臺：重組(zu)兔(tu)單(dan)抗(kang)、重組(zu)鼠(shu)單(dan)抗(kang)、快(kuai)速鼠(shu)單(dan)抗(kang)、重組(zu)蛋(dan)白(bai)開(kai)發平(ping)臺（E.coli,CHO,HEK293,InsectCells）,已正式通過歐盟(meng)98/79/EC認證(zheng)、ISO9001認證(zheng)、ISO13485。

如(ru)何科(ke)學(xue)選擇高(gao)質(zhi)量的(de)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)？