M13噬菌(jun)體檢(jian)測(ce): 噬菌(jun)體展示抗體新藥(yao)篩(shai)選重要(yao)的壹環(huan)！

噬菌(jun)體（Bacteriophage，簡稱(cheng)“噬(shi)菌(jun)體"或“噬(shi)菌(jun)病毒"）是(shi)壹類專(zhuan)門(men)感染細(xi)菌(jun)的病毒。它們(men)是(shi)由蛋(dan)白質外(wai)殼和(he)內(nei)部的遺(yi)傳(chuan)物(wu)質(zhi)（DNA或(huo)RNA）組(zu)成。噬菌(jun)體在自然界(jie)中廣(guang)泛(fan)存(cun)在(zai)，能(neng)夠(gou)在(zai)細(xi)菌(jun)的表面附(fu)著並將其遺(yi)傳(chuan)物(wu)質(zhi)註(zhu)入(ru)細(xi)菌(jun)細(xi)胞(bao)內，從(cong)而利用細(xi)菌(jun)的生物(wu)機制(zhi)進(jin)行(xing)復制(zhi)。

常見(jian)的(de)噬菌(jun)體種類

M13噬(shi)菌(jun)體的結(jie)構(gou)示意圖

噬(shi)菌(jun)展示技術介(jie)紹

歷史(shi)背(bei)景

該技術由George Smith於(yu)1985年(nian)，因其在定向分子進(jin)化中的(de)貢(gong)獻(xian)，Smith與Gregory Winter共(gong)同(tong)獲(huo)得2018年(nian)諾(nuo)貝(bei)爾(er)化學(xue)獎(jiang)。M13因其溫和特性（不裂解宿(xiu)主）成為(wei)常用(yong)的展示載體之壹。

基本(ben)原理

M13噬(shi)菌(jun)體是(shi)壹種(zhong)感染大(da)腸桿(gan)菌(jun)的絲(si)狀噬菌(jun)體，其基因組(zu)為(wei)單(dan)鏈DNA。展示技術的(de)核心(xin)是(shi)通(tong)過基因工(gong)程(cheng)將外(wai)源(yuan)蛋(dan)白基因與噬(shi)菌(jun)體衣(yi)殼蛋(dan)白（如pIII或pVIII）基因融合(he)，使外(wai)源(yuan)蛋(dan)白在噬菌(jun)體表面(mian)表(biao)達(da)。

pIII蛋(dan)白：位(wei)於(yu)噬菌(jun)體末端(duan)，通常展示單拷貝(bei)的(de)大(da)分子蛋(dan)白（如抗體片(pian)段(duan)）。

pVIII蛋(dan)白：構(gou)成噬菌(jun)體主要(yao)衣(yi)殼，適(shi)合展示多拷貝(bei)的(de)小(xiao)肽(tai)（如(ru)10-20個氨(an)基酸(suan)）。

技術流(liu)程(cheng)

1.基因克隆：將目標(biao)蛋(dan)白或肽的編(bian)碼基因克隆到(dao)M13噬菌(jun)體的基因組(zu)中，通(tong)常是(shi)插(cha)入到(dao)編碼噬菌(jun)體外(wai)殼蛋(dan)白的基因中。

2.噬(shi)菌(jun)體文庫(ku)構(gou)建(jian)：轉(zhuan)化(hua)改(gai)造(zao)後(hou)的M13噬(shi)菌(jun)體到(dao)大(da)腸桿(gan)菌(jun)中，感(gan)染細(xi)菌(jun)後(hou)，噬菌(jun)體會(hui)在(zai)細(xi)菌(jun)內復制(zhi)並合成外(wai)殼蛋(dan)白，同(tong)時(shi)將目標(biao)蛋(dan)白或肽展示在噬菌(jun)體表面(mian)。

3.親(qin)和篩(shai)選（Panning）：將噬菌(jun)體與固(gu)定(ding)化的(de)靶分子（如(ru)抗原）孵(fu)育。洗(xi)去未(wei)結(jie)合(he)的(de)噬(shi)菌(jun)體，保留(liu)特(te)異性結(jie)合(he)的噬(shi)菌(jun)體。

4.擴增與(yu)富集：回收結合的(de)噬(shi)菌(jun)體，感染大(da)腸桿(gan)菌(jun)擴增，重復篩(shai)選3-4輪以提高結合(he)力(li)。

5.鑒定(ding)：通(tong)過(guo)測(ce)序或功能實(shi)驗分(fen)析(xi)篩(shai)選出(chu)的噬菌(jun)體攜(xie)帶的外(wai)源(yuan)基因。

The general process of biopanning

核心(xin)優(you)勢(shi)

直(zhi)接基因關聯：噬(shi)菌(jun)體攜(xie)帶外(wai)源(yuan)蛋(dan)白的編碼基因，便(bian)於後(hou)續(xu)克(ke)隆。

高通(tong)量篩(shai)選：可快速篩(shai)選數(shu)百(bai)萬(wan)至(zhi)數(shu)十(shi)億(yi)個分(fen)子。

無(wu)需蛋(dan)白純(chun)化(hua)：展示的蛋(dan)白直接用於(yu)結合(he)實(shi)驗。

應用(yong)領域(yu)

抗體篩(shai)選：M13噬菌(jun)體展示技術廣(guang)泛(fan)的應用(yong)之壹就(jiu)是(shi)單(dan)克隆抗體的篩(shai)選。通過展示不同(tong)抗體片(pian)段(duan)（如重鏈或(huo)輕(qing)鏈的(de)可(ke)變(bian)區(qu)），可(ke)以快速篩(shai)選出(chu)與特定(ding)抗原結(jie)合的(de)抗體。這些(xie)抗體可以(yi)用(yong)於疾(ji)病診(zhen)斷(duan)、治(zhi)療(liao)等領域。

疫苗開(kai)發(fa)：可(ke)以(yi)利用噬(shi)菌(jun)體展示技術展示病原(yuan)體的表(biao)面(mian)抗原，通(tong)過篩(shai)選獲得與病原(yuan)物(wu)質(zhi)相(xiang)互作用(yong)的(de)抗原肽(tai)，這為(wei)疫(yi)苗的(de)設(she)計提供(gong)了線索。

藥物(wu)篩(shai)選：該技術還(hai)可(ke)用(yong)於小(xiao)分(fen)子藥(yao)物(wu)的(de)篩(shai)選，尤(you)其是(shi)在(zai)尋找靶標(biao)分(fen)子或(huo)蛋(dan)白質相(xiang)互作用(yong)方(fang)面。例(li)如(ru)，通過展示小肽，可(ke)以篩(shai)選出(chu)具有特定(ding)生物(wu)活(huo)性的(de)分(fen)子。

蛋(dan)白質-蛋(dan)白質相(xiang)互作用(yong)研(yan)究：利用噬(shi)菌(jun)體展示技術，可(ke)以(yi)探(tan)究(jiu)不同(tong)蛋(dan)白質之間(jian)的(de)相(xiang)互作用(yong)。例(li)如(ru)，通過展示壹個蛋(dan)白的特定片(pian)段(duan)，尋找能夠結(jie)合(he)該(gai)片(pian)段(duan)的其他蛋(dan)白質。

新型(xing)酶(mei)的開(kai)發(fa)：通(tong)過(guo)展示酶(mei)活性位(wei)點(dian)的特(te)定肽(tai)，可(ke)以篩(shai)選出(chu)具有所需酶(mei)活性的(de)突變體或全新酶(mei)。

斯(si)達(da)特(te)研發的(de)M13 抗體和壹步(bu)法(fa)試(shi)劑盒是(shi)M13噬(shi)菌(jun)體檢(jian)測(ce)兩大(da)有力工(gong)具。歡(huan)迎大(da)家(jia)選購！

部分數(shu)據展示

M13 phage Recombinant Rabbit mAb (Biotin Conjugate) (S-1403-13) （貨號：S0B1686）

Indirect ELISA binding analysis of M13 phage Recombinant Rabbit mAb (Biotin Conjugate) (S-1403-13)

Coating: M13 phage, 1*10E7 pfu/ml

Primary antibody: M13 phage (Biotin Conjugate) (S-1403-13), from 1μg/ml, 3-fold diluent, 7 points

M13 OneStep ELISA Kit（貨(huo)號：S0C3033）

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